腸道病毒EV71型(EV-71)試劑盒(熒光-PCR法)為上海滬崢PCR主要產品之一，產品優(yōu)勢 樣品種類多，質控嚴格，高特異性，供貨快，已被國內外廣大科研工作者使用，被稱謂：質量信得過產品
通用名稱：腸道病毒EV71型(EV-71)試劑盒(熒光-PCR法)

規(guī)格：50T/盒

英文名稱：EV-71 Detection Kit (Real-Time PCR Method)

自備試劑：樣品 RNA

【檢驗原理】

本試劑盒對腸道病毒EV71型(EV-71)基因保守區(qū)設計特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術對核酸進行體外擴增檢測，從而達到快速檢測之目的。

【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存、運輸、避免反復凍融，有效期12個月。

【適用儀器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運輸】

上述標本短期內可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個月，標本運送應采用0℃冰代。

結果判斷

陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數增長曲線；

可疑：檢測通道 35值≤38，建議重復檢測，如果檢測通道仍為 35值≤38， 且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；

陰性：樣本檢測結果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

質控標準

陰性質控品：Ct 值>38 或無 Ct 值；

陽性質控品：擴增曲線有明顯指數生長期，且 Ct 值≤32； 以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

1. 即開即用，用戶只需要提供樣品RNA模板。

2. 引物和探針經過優(yōu)化，靈敏性高。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. 特異性高，引物是根據馬動脈炎病毒高度保守區(qū)設計，不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。

5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。

6. 本產品只能用于科研

7.．不同批號試劑請勿混合使用，在有效期內使用。

運輸及保存： 低溫運輸，2-8℃保存，保存期限為12個月。

注意事項

：所有試劑使用前需完全解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。

1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。