Q熱立克次（CB）體試劑盒（熒光-PCR法）

規(guī)格：50T/盒

自備試劑：樣品 RNA

【檢驗原理】

本試劑盒對Q熱立克次（CB）基因保守區(qū)設計特異性的引物和探針[1-3]，用熒光 PCR 技術對核酸進行體外擴增檢測，從而達到快速檢測之目的。

【儲存條件及有效期】

-20℃避光保存、運輸、避免反復凍融，有效期12個月。

【適用儀器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他熒光定量PCR檢測儀。
【保存和運輸】

上述標本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過6個月，標本運送應采用0℃冰壺。

結(jié)果分析條件設定

設置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機器自動分析的結(jié)果分析，當曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動閾值線至高于陰性對照)，重新分析結(jié)果。

判斷

陽性：檢測通道Ct值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線：

可疑：檢測通道35

   且曲線有明顯的增長曲線，判定為陽性，否則為陰性；

  陰性：樣本檢測結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。

  6.質(zhì)控標準

   陰性質(zhì)控品：Ct值＞38或無Ct值顯示；

   陽性質(zhì)控品：擴增曲線有明顯指數(shù)生長期，且Ct值≤32

  以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR反應五要素：

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物： 引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。

Q熱立克次（CB）體試劑盒（熒光-PCR法）相關產(chǎn)品

副豬嗜血桿菌(HPS)試劑盒(熒光-PCR法)

豬痢疾蛇形螺旋體(SH)試劑盒(熒光-PCR法)

傳染性胸膜肺炎放線桿菌(APP)試劑盒(熒光-PCR法)

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豬鏈球菌通用型(SS-U)試劑盒(熒光-PCR法)

豬鏈球菌2型(SS-2)試劑盒(熒光-PCR法)

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口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)試劑盒(熒光-PCR法)

豬藍耳病病毒通用型(PRRSV-U)試劑盒(熒光-PCR法)

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豬流行性腹瀉病毒(PEDV)試劑盒(熒光-PCR法)

豬輪狀病毒A組(PRV-A)試劑盒(熒光-PCR法)

日本乙型腦炎病毒(JEV)試劑盒(熒光-PCR法)

豬水皰性口炎(VSV)試劑盒(熒光-PCR法)