品    名：核酸外切酶I(Exonuclease I, E.coli)

規(guī)    格：1500 μ

核酸外切酶I(Exonuclease I)具有從3’-5’方向降解單鏈 DNA 的外切酶活性，能夠逐步釋放脫氧核糖核酸5'單磷酸，并留下完整的5'端二核苷酸。該酶來(lái)源于攜帶有E. coli exo I 基因的質(zhì)粒，經(jīng)重組表達(dá)純化而得。Exonuclease I多用于PCR擴(kuò)增后降解消化引物，該酶對(duì)于雙鏈DNA和磷酰或乙酰基團(tuán)封閉的3’OH末端DNA鏈無(wú)活性。
單位定義
1 單位指在 37℃ 條件下，30 分鐘內(nèi)催化釋放 10 nmol 的酸溶性核苷釋放所需要的酶量。
組分
名稱 數(shù)量
Exonuclease I(20 U/μl) 75 μl
10×ExoI Buffer 1 ml
核酸外切酶I應(yīng)用
從PCR混合物中去除引物
PCR產(chǎn)物測(cè)序之前用于在單管中使用大引物進(jìn)行的PCR誘變反應(yīng)
從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA
檢測(cè)含有3'羥基末端的單鏈DNA的存在
儲(chǔ)存
置于-20°C，可保存3年。
核酸外切酶I使用注意事項(xiàng)
（1）1×ExoI Buffer：67mM Glycine-KOH pH 9.5，6.7mM MgCl2，10mM 2-巰基乙醇。該酶在常規(guī)PCR Buffer中也具有活性。
（2）該酶的*反應(yīng)溫度為37°C，80°C 20min可失活。
（3）該酶不能切割雙鏈DNA，因此含有二級(jí)結(jié)構(gòu)的單鏈DNA需要變性后才能完全消化。