TMB單組份顯色液說明書

目前酶免疫分析（EIA)技術，已被廣泛應用于抗原，半抗原或抗體的定量或定性檢測分析。辣根過氧化物酶（HRP)及其偶聯物是酶聯免疫分析技術中常用的一種酶，由于3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB)在HRP的顯色反應體系中，比其它色原具有更高的靈敏度且無致癌性而被廣泛應用。TMB主要應用于酶聯免疫吸附實驗（ELISA)，免疫斑點雜交或者免疫組化以及氯和過氧化氫的檢測分析。為了滿足不同的試劑盒產品研發與生產以及科研需求，本公司專門研制了針對不同類型的基于HRP的免疫分析用TMB顯色液。

產品特點：

即用型：無需混合，方便快捷，減少誤差

靈敏度高：不低于A、B液

穩定性好：2-8℃保存，有效期不低于36個月；顯色終止后讀數穩定

背景低：底物溶液在650nm檢測時檢測OD值小于0.04

質量可靠：產品批間差異小

外觀：本試劑一般情況下為無色，有時略顯淺藍色或淺黃色

使用方法：

用適當的干凈容器（用純凈水反復沖洗），倒出適量的單組分TMB顯色液，待達到室溫后即可使用。

加液：加完HRP結合物并孵育一定時間后，用適當洗滌液洗板3-5次，每孔加TMB顯色液100ul。 根據個人實驗需要，在室溫（15-25℃）或37℃下避光溫育10-30分鐘或更長時間，直至顯色至預期深淺。

終止：加入等體積的1M 鹽酸或硫酸溶液終止反應，孔中反應液由藍色變為黃色。

讀數：終止反應后30分鐘內在450nm處測定吸光值。

注意：如果出現高的反應背景或沉淀，表明TMB底物反應過于強烈。為了避免產生沉淀，可在終止后馬上讀數；或者進一步稀釋一抗和/或HRP結合物。

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