小鼠免疫球蛋白IgE試劑盒說(shuō)明書(shū) 詳細(xì)介紹

名    稱：小鼠免疫球蛋白IgE試劑盒 說(shuō)明書(shū)檢測(cè)種屬：小鼠

標(biāo)記物：HRP

檢測(cè)方法：酶聯(lián)免疫法

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

規(guī)    格：96孔/48孔

保 質(zhì) 期：6個(gè)月
保存溫度：2-8℃

所需樣本體積：50-100ul

產(chǎn)    地：國(guó)產(chǎn)(上海)/進(jìn)口(美國(guó))

適用范圍：僅供科研，不得用于其他用途，禁止用于臨床

上海滬崢生物ELISA試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)，價(jià)格實(shí)惠，質(zhì)量保證，免費(fèi)待測(cè)，想要更多了解公司產(chǎn)品及優(yōu)惠信息，請(qǐng)來(lái)電咨詢或在線咨詢！歡迎您的來(lái)電,如有需要我們將竭誠(chéng)為您服務(wù)！

一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存；

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無(wú)菌試管中；

2、 采血后室溫靜置1小時(shí)；

3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。 

大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的 ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。

二、ELISA實(shí)驗(yàn)中血漿的采集、處理和保存；

1、 真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無(wú)菌試管中；

2、 按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；

3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心5min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

5、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。 請(qǐng)注意指標(biāo)說(shuō)明書(shū)上對(duì)于抗凝血?jiǎng)┦欠裼刑厥庖螅ㄗh使用EDTA。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外，其他成份均同等于血清。

注意事項(xiàng)：制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑EDTA,抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原干擾而造成假陽(yáng)性。

三、ELISA 實(shí)驗(yàn)中尿液的采集、處理和保存；

1、 采集尿液樣本500ul，加入無(wú)菌試管中；

2、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的樣本留上清，棄下面沉淀。

3、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

4、 根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。

四、ELISA 實(shí)驗(yàn)中腦脊液的采集、處理和保存；

1、采集腦脊液樣本，加入無(wú)菌試管中；

2、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的樣本留上清，棄下面沉淀。

3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。

五、ELISA 實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞上清液的采集、處理和保存；

1、采集細(xì)胞培養(yǎng)上清液500ul，加入無(wú)菌試管中；

2、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

3、取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。

六、ELISA 實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞裂解液的采集、處理和保存；（需要測(cè)蛋白濃度）

1、 取細(xì)胞培養(yǎng)板或細(xì)胞懸液，用PBS（PH7.2-7.4）洗滌細(xì)胞培養(yǎng)板1-2次。

2、 通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑（裂解液），使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。

3、 將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心20min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。

4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?/p>

2-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；

-20℃下，可放置保存1個(gè)月；

-70℃下，可放置保存6個(gè)月；

1、試劑未平衡至室溫：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒從冰箱取出平衡至室溫。
2、檢測(cè)體積偏小：檢查移液器吸液管道是否堵塞。
3、孵育時(shí)間過(guò)短：使用計(jì)時(shí)器，準(zhǔn)確孵育時(shí)間。
4、底物受污染：使用新配置的試劑，重新實(shí)驗(yàn)。
5、包裝袋中有濕氣：檢查袋中是否有干燥劑。
6、樣本中有抑制劑：疊氮鈉會(huì)抑制HRP酶的活性。

1、倍比稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)未混勻：稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的每一步均需混勻。
2、過(guò)早稀釋：標(biāo)準(zhǔn)品在快要使用時(shí)稀釋。
3、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤：嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求稀釋標(biāo)準(zhǔn)品。
4、加入的體積不正確：使用校準(zhǔn)過(guò)的移液器，快速、等量的將標(biāo)準(zhǔn)品分配到各個(gè)微孔中。
5、波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤：TMB為底物和以O(shè)PD為底物的試劑盒均有使用，而 前者比色波長(zhǎng)為450nm，后者為492nm。雙波長(zhǎng)比色分析優(yōu)于單波長(zhǎng)。
6、標(biāo)準(zhǔn)品混用：不同批號(hào)試劑勿混用。
7、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高，標(biāo)準(zhǔn)品失活：盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫。