牛（Bovine）抑肽酶（AP）ELISA檢測試劑盒產品參數

名稱：牛（Bovine）抑肽酶（AP）ELISA檢測試劑盒

規格：48T/96T

保存溫度：2-8度

有效期：6個月

本試劑盒 于科學科研使用，請勿用于醫藥、臨床診斷 或 ，食品及化妝品等用途。

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被抗體的微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并 洗滌。用底物TMB顯色   ，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化 最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度   。

牛（Bovine）抑肽酶（AP）ELISA檢測試劑盒組成及試劑配制 :

1. 酶聯板：一塊(96孔) 

2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內配制。

如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。

4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。

5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。

6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔)，實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。

    樣品類型（SAMPLE TYPES）： 標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清

或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。

   樣品采集：收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，

將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。 

  操作步驟：參照說明書靈敏度:具體請查看說明書.檢測范圍（RANGN）：具體請查看說明書.

本試劑盒 于科學科研使用，請勿用于醫藥、臨床診斷 或 ，食品及化妝品等用途。

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被抗體的微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并 洗滌。用底物TMB顯色   ，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化 最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度   。

生物安全

1. 檢測必須符合實驗室管理規范的規定，嚴格防止交叉污染，所有樣品、洗棄液和各種廢棄物都應按照傳染物進行處置。

2.試劑盒的液體組分中，含有Proclin-300防腐劑，可能引起皮膚過敏反應，避免吸入煙霧與皮膚接觸。

3.底物液對皮膚、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入煙霧。戴上防護手套，實驗完成后 洗手。

技術提示

1.混合蛋白溶液時，避免起泡。

2.加校準品與樣本時，每個校準品濃度和樣本都要更換移液槍頭，公共組分應該懸臂加樣 ，避免交叉污染。

3.合適的溫育時間，和充分的洗滌步驟，是保證實驗結果準確性的必要條件。

4.底物溶液為無色液體，保存過程中變為藍色，代表底物溶液已經失效，不得使用。

5.終止液加樣順序與底物溶液加樣順序一致，加入終止液后，藍色底物產物，會瞬間變為黃色，

6.實驗中，用剩的板條，應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥） 保存。

7.所有液體組分，使用前充分搖勻， 嚴格按照說明書標明的時間、加樣量及加樣順序進行溫育操作。