牛腎細(xì)胞來源于ATCC原代細(xì)胞，ATCC傳代細(xì)胞，sciencell細(xì)胞

原代凍存或復(fù)蘇培養(yǎng)，復(fù)蘇時間1-2周，保證細(xì)胞純度在98%以上，同時也需經(jīng)過微生物檢測，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌.   

細(xì)胞名稱 ：  牛腎細(xì)胞

簡稱:MDBK(NBL-1)                                    

組織來源：腎；正常細(xì)胞

培養(yǎng)條件：RPMI-1640 +10% FBS

形       態(tài)：貼壁；上皮細(xì)胞樣

背       景：1957年２月18日，S.H. Madin和N.B. Darby從一只表觀正常的成年牛*建立了MDBK細(xì)胞株。1973年這株MDBK細(xì)胞被牛病毒性痢疾病毒(BVDV)感染。 1982年發(fā)現(xiàn)了一株未被BVDV感染的MDBK細(xì)胞株。 這株細(xì)胞最初來自ATCC 1967年７月第96代的凍存管。 這株MDBK細(xì)胞的后代經(jīng)NVSL檢測，未發(fā)現(xiàn)被任何病毒污染的證據(jù)。 1982年８月，R.A. Van Deusen將其提供給ATCC時，已傳代至*10代。 這株細(xì)胞未被BVDV感染。

細(xì)胞數(shù): 1×106cells

規(guī)格: 1ml/T25

運(yùn)輸保存:采用干冰保存運(yùn)輸

細(xì)胞用途：僅供科研使用

牛腎細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程僅供參考

準(zhǔn)備好培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件及凍存液。

細(xì)胞處理

復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，先要消化處理并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。消化方法按照細(xì)胞傳代方法的1-3步驟進(jìn)行，*的重懸液使用血清。懸浮細(xì)胞直接計數(shù)后離心，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中。

牛腎細(xì)胞購買細(xì)胞注意事項：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請拍下照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件.

6. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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