原代凍存或復蘇培養，復蘇時間1-2周，保證細胞純度在98%以上，同時也需經過微生物檢測，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌.

細胞名稱 ：人胚腎細胞

簡稱: AAV-293

組織來源：腎；以腺病毒5 DNA 進行轉化

培養條件：DMEM（高糖）+10% FBS+1% P/S

形       態：貼壁；上皮細胞樣

背       景：我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關重組病毒。AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株，但產生的病毒滴度更高。跟HEK293細胞一樣，AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因，當共轉染三個AAV助質粒(一個含ITR的質粒，pAAV-RC和E1缺失助質粒)時，可以產生有感染力的腺病毒-相關病毒顆粒。

細胞數: 1×106cells

規格: 1ml/T25

運輸保存:采用干冰保存運輸

細胞用途：僅供科研使用

人胚腎細胞，AAV-293培養操作規程僅供參考

準備好培養基及培養凍存條件及凍存液。

細胞處理

復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。 天換液并檢查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養

細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，*的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。

人胚腎細胞，AAV-293購買細胞注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件.

6. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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