原代凍存或復蘇培養，復蘇時間1-2周，保證細胞純度在98%以上，同時也需經過微生物檢測，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌.

人胚腎細胞，293(HEK-293)產品信息

細胞簡稱:293T/17

中文名稱:人胚腎細胞

種屬:人

培養基條件:DMEM（高糖） + 10% FBS+1% P/S

特性:貼壁

形態：上皮細胞樣

來源：ATCC

規格: 1ml/T25

運輸保存:采用干冰保存運輸

細胞用途：僅供科研使用

培養操作規程僅供參考

準備好培養基及培養凍存條件及凍存液。

細胞培養簡介：

原代培養

原代培養是指將細胞從組織中分離后,使其在合適的條件下増殖直到占據所有可用基質

（即:達到匯合狀態）的培養階段。在此階段,必須將細胞轉移到新的容器中并更換新鮮 培養基，從而對細胞進行傳代培養，為其提供更多繼續生長的空間。

細胞株

如果將細胞系的一個亞群通過*或者其他方法從培養物中明確地選擇出來，則此細胞

系就成為一個細胞株。與親代細胞系起始時相比,細胞株往往會獲得其他一些遺傳學 改變。

細胞系

*傳代培養后,原代培養物即被稱為細胞系或者亞來自于原代培養的細胞系

壽命有限（即:有限細胞系，見下文），隨看細胞的傳代，生長能力*的細胞會占據優

勢,最終導致細胞群體在基因型和表型上達到一定程度的均一性。

細胞培養條件：

各種細胞的培養條件相差很大，但是細胞培養的人工環境必須包括合適的容器，容器中 含有一定的基質或介質，為細胞提供必需的莒養素（氨基酸、碳水化合物、維生素、礦物 質）、生長因子、激素和氣體（02、C02）,并可調節其物理化學環境（pH、滲透壓、溫度）。 大多數細胞均具有貼壁依賴性，必須貼附在固體或半固體基質上培養（貼壁或者單層培養）， 而另一些細胞則可在培養基中漂浮生長（懸浮培養）。

傳代培養過程

細胞處理

復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。 天換液并檢查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養

細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行，*的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中。

人胚腎細胞購買細胞注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于培養箱內靜置培養過夜，隔天再取出觀察。此時多數細胞均會貼壁，若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力，如果證實細胞活力正常，請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養；如果染色結果顯示細胞無活力，請拍下照片及時和我們聯系，信息確認后我們為您再免費寄送一次。

4. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用，細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養基混合，使細胞逐漸適應培養條件.

6. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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